مراحل اجرا

1. ابتدا 11 لوله آزمایش را در جا لوله قرار داده و به ترتیب از شماره 1 تا 11 آنها را شماره گذاری می کنیم .
2. به تمامی لوله ها به غیر از لوله شماره 1،یک حجم از سرم فیزیولوژی نرمال سالین معادل 100 میکرولیتراضافه می کنیم .
3. یک حجم از آنتی سرم A (سرم بیمار) معادل 100 میکرولیتر در لوله های شماره 1و2 اضافه می کنیم .
4. لوله 2 را به آرامی مخلوط کرده و یک حجم از محتوای آن را به لوله شماره 3 انتقال می دهیم .
5. پس از مخلوط کردن لوله شماره 3 به آرامی یک حجم از لوله شماره 3 برداشته و به لوله شماره 4 انتقال  داده واین عمل را تا لوله شماره 11 ادامه می دهیم، لوله شماره 11 را نیز مخلوط کرده و یک حجم از آن را برداشته و دور می ریزیم .
6. پس از انجام مراحل فوق رقت های 1:1 تا 1:1024 از آنتی سرم مربوطه به دست می آید .
7. سپس به تمامی لوله ها یک حجم از  سوسپانسیون A cell اضافه  می کنیم .
8. لوله ها را به مدت45-30 دقیقه در دمای اتاق قرارمی دهیم .
9. لوله ها را به مدت 30-15 ثانیه سروفیوژ می کنیم .
10. نتایج لوله ها را طبق نحوه قرائت و درجه بندی واکنش ها قرائت می کنیم .
11. آخرین لوله ای که دارای واکنش +1 می باشد را انتخاب می کنیم .
12. لوله انتخاب شده را به عنوان تیتر آنتی سرم مربوطه در فرم تیتراسیون آنتی سرم گروه های خون ثبت  می کنیم .

آنتی سرمB  :

1. طبق روش آنتی سرم A عمل می کنیم فقط در بند 3 آنتی سرم B به لوله ها اضافه می کنیم.
2. در بند 7 سوسپانسیون B cell اضافه می کنیم.
3. بقیه مراحل مشابه آنتی A است.

آنتی سرم D :

1. طبق روش فوق عمل نمایید فقط در بند 3 آنتی سرم D را به تمامی لوله ها اضافه می کنیم.
2. در بند 7 سوسپانسیون O cell (مثبت) اضافه می کنیم.
3. در بند 8 لوله ها را به مدت 60 دقیقه در 37 درجه سانتیگراد قرارمی دهیم.
4. بقیه مراحل مشابه است.

تفسیر آزمایش

• آنتی سرم هایی که مورد تایید قرار می گیرند باید دارای تیتراسیون (Potency)قابل قبول باشند.

گزارش و محدوده طبیعی نتایج برای آزمایش مورد نظر:

برای انتی سرم A : تیتر 1:128 تا 1:256

برای آنتی سرم B : تیتر 1:128 تا 1:256

برای انتی سرم D : تیتر 1:32 تا 1:64

• نکته: در صورتی که شرکت سازنده آنتی سرم بر روی آن تیتر قابل قبول را ذکر نموده باشد آن تیتر به عنوان محدوده طبیعی تیتر قابل قبول برای آنتی سرم محسوب می گردد.